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问1、三种引物怎么选择?
答:oligo(dT) 侧重 mRNA(带 polyA);随机六聚体适用于总 RNA 与无 polyA 的 RNA;基因特异性引物灵敏度最高,适合低丰度靶标。
问2、为什么要去除 gDNA?
答:残留基因组 DNA 会导致 qPCR 假阳性或 Ct 值偏低,试剂盒含 gDNA 去除步骤,同时建议设置 -RT 对照验证。
逆转录试剂盒提供从总 RNA 到 cDNA 第一链的高效合成方案,含基因组 DNA 去除剂,支持 oligo(dT)₁₈、随机六聚体与基因特异性引物三种引物策略,产物兼容后续 SYBR Green qPCR 定量、常规 PCR 与文库构建。 适用场景:mRNA / miRNA 表达分析、转录组研究、病毒 RNA 检测、RT-PCR。
| 模板用量 | 总 RNA 1 pg-1 μg |
| gDNA 去除 | 含基因组 DNA 去除步骤 |
| 引物策略 | oligo(dT)₁₈ / 随机六聚体 / 基因特异性引物 |
| 反应体系 | 20μL(可按比例调整) |
| 储存条件 | -20°C 保存 |
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